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Kastle -Meyer試験は、1903年に最初に記述された推定 血液検査であり、化学指示薬 フェノールフタレインを使用してヘモグロビンの存在の可能性を検出します。これは、血中のヘモグロビンのペルオキシダーゼのような活性に依存して、フェノールフタレイン（フェノールフタレインの無色の還元型）のフェノールフタレインへの酸化を触媒します。フェノールフタレインは明るいピンク色で表示されます。Kastle-Meyer試験は、触媒血液検査の一種であり、血液の化学的同定において犯罪研究所で一般的に採用されている2つの主要な法医学検査の1つです。この目的で使用される他のクラスのテストは次のとおりです。テイクマン結晶試験や高山結晶試験などの微結晶試験。
ジョセフ・ホーイング・キャッスル
この検査は、1901年に粗血液検査を発明して検査したアメリカの農芸化学者Joseph Hoeing Kastle（1864–1916）と、検査を修正したドイツの医師兼化学者Erich Meyer（1874–1927）にちなんで名付けられました。 1903年。
コンテンツ
1 歴史
2 方法
3 制限事項
4 機構
5 参考文献
6 その他の情報源
歴史
1901年、米国のジョセフ・ホーイング・キャッスルとオリバー・マーチ・シェッドは、生物学的物質が弱アルカリ性溶液中でフェノールフタレインをフェノールフタレインに酸化させる可能性があることを発見しました。 1903年、ドイツのErich Meyerは、血球も反応を引き起こす可能性があることを発見しました。 1906年、KastleとAmossは、血中のニワトリヘモグロビンが反応を引き起こすことを発見しました。 1909年、キャッスルは、検査が非常に希薄な血液サンプルに敏感であることを発見しました。しかし、1908年、Pozzi-Escot（当時はペルーのリマに住んでいた）は、血液以外の多くの物質に反応して、この検査で偽陽性反応が生じることを発見しました。
方法
推定される血液サンプルは、最初に綿棒で収集されます。フェノールフタレイン試薬を1滴サンプルに加え、数秒後、過酸化水素を1滴スワブに塗布します。綿棒が急速にピンク色に変わる場合、それは血液の推定陽性をテストすると言われています。30秒以上待つと、ほとんどの綿棒が空気中で自然に酸化するため、自然にピンク色に変わります。
存在する細胞を溶解し、感度と特異性を高めるために、スワブを最初にエタノール滴で処理することができます。このテストはサンプルを破壊するものではなく、ラボでのさらなるテストで保持および使用できます。ただし、Kastle-Meyer試験に使用した綿棒を今後の試験で使用するラボはほとんどなく、代わりに元の染みの新しい綿棒を使用することを選択しました。
制限事項
Kastle-Meyer試験は、1 ：10 7までの血液希釈を検出できると報告されていますが、この試験にはいくつかの重要な制限が銅やニッケル塩などの化学酸化剤は、過酸化水素を添加する前にKastle–Meyer試薬をピンク色に変えるため、最初に試薬を添加し、次に数秒待ってから過酸化水素を添加することが非常に重要です。
Kastle-Meyer試験は、他のヘモグロビンベースの血液と同じように人間の血液と反応するため、Ouchterlony Testなどの確認試験を実行して、血液がどの種に由来するかを明確に結論付ける必要が
色触媒試験は非常に敏感ですが、特定ではありません。陽性のカラーテストだけでは、血液の陽性の証拠として解釈されるべきではありません。陰性の結果は、一般に、検出可能な量のヘムが存在しないことの証拠ですが、還元剤の存在下で偽陰性が発生する可能性がこの検査では、血液中に何が含まれているかについて具体的な証拠を示すことはできません。
機構
このテストで使用されたフェノールフタレインは、 2つの電子によって還元され、アルカリ性溶液に事前に溶解されているという点で、従来の形式から変更されています。これは通常、フェノールフタレインのアルカリ性溶液を粉末亜鉛と一緒に沸騰させることによって達成され、フェノールフタレインをフェノールフタリンに還元します。還元すると、フェノールフタレインのカチオン型の非常に強いピンク色がかすかな黄色に退色します。Kastle–Meyer試験キットに含まれているのはこの形態のフェノールフタレインです。テストが陽性であることを示す濃いピンク色を生成するには、還元フェノールフタレインを酸化して通常の着色された形に戻す必要が
関連する反応では、過酸化水素は血液中のヘモグロビンと反応します。フェノールフタリンはこのプロセスに直接関与しません。代わりに、それは電子の外部源として機能します。過酸化水素との反応において、ヘモグロビンのヘム中心はペルオキシダーゼとして振る舞い、過酸化物を水に還元します。この活動により、ヘモグロビンから電子が枯渇し、電子がフェノールフタリンによって再供給されます。ヘモグロビンに電子を提供すると、フェノールフタレインが濃い色のフェノールフタレインに戻ります。酵素が生き残る限り、ヘムと過酸化物との反応は触媒的であり、このテストはテストスワブに存在する少量の血液に非常に敏感になります。発生する過酸化物のヘモグロビン触媒還元は、以下の反応に示されています。2つの電子はフェノールフタリンによって供給されます。
HOOH + 2 e
− + 2H H2 O
反応中のプロトンの消費は、溶液のpHを上げる効果がありますが、生成される塩基の量は、試薬混合物にすでに存在する塩基の量と比較してごくわずかです。
参考文献
^ Meyers、Thomas C.（2006）。「第21章：血清学」。ウェクトでは、シリルH . ; ラゴ、ジョンT.（編）。法医学と法：刑事、民事、および家族の正義における調査アプリケーション。フロリダ州ボカラトン：CRCプレス。pp。410–412。ISBN 0-8493-1970-6。
^ [参照：Joseph H. Kastle and Oliver March Shedd（1901）「酸化発酵の試薬としてのフェノールフタリン」、 American Chemical Journal、 26（6）：526–539。] ^ [参照：Erich Meyer（1903） “BeiträgezurLeukocytenfrage。FermentederLeukocyten” [白血球に関する質問への寄稿。白血球の酵素] ^ MünchenerMedizinischeWochenschrift、 50（35）：1489–1493; 特に1492〜1493ページを参照して] ^ [参照：JosephH.KastleおよびHaroldLindsayAmoss、健康と病気における血液のペルオキシダーゼ活性の変動。私たち。Hygienic Laboratory Bulletin No. 31.（ワシントン、DC：米国公衆衛生および海洋病院サービス、米国政府印刷局、1906年）。] ^ [参照：Joseph H. Kastle、血液の化学的試験。米国衛生研究所会報第51号（ワシントンDC：米国公衆衛生海洋病院サービス、米国政府印刷局、1909年）。] ^ [参照： Marius Emmanuel Pozzi-Escot（1908） “Emploidelaphénolphtalinecommeréactifdusang [血液の試薬としてのフェノールフタリンの使用]、” BulletindesSociétésChimiquesBelges、 22（11）：415–416。] ^ Kastle–Meyer試験の歴史の詳細については、Robert E. Gaensslen、法医学血清学、免疫学、および生化学のソースブック（1989年版）（ワシントンDC：国立司法省、米国司法省、1983年））、103〜105ページ。オンラインで利用できます。
その他の情報源
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Gaensslen、Robert E.、Sourcebook in Forensic Serology、Immunology、and Biochemistry、 Washington、DC：US Government Printing Office、1983。
カーク、ポールL.、犯罪調査、ジョンワイリーと息子、1974年。
メトロポリタン警察法医学研究所、生物学的方法マニュアル、 1978年。
ポンセ、アナ・カステッロ; Pascual、Fernando A.Verdú、「血痕の推定テストの重要な改訂」、 法医学コミュニケーション、 vol。1、No。2、1999年7月、1〜15ページ。
Saferstein、Richard、Forensic Science Handbook、 Prentice Hall、Inc.、1982年。