Niacin_test
ナイアシン検査は、1960 年代から臨床検査室で抗酸菌を種レベルで同定するために広く使用されてきました。ナイアシン テストは、培養液の水性抽出物中のナイアシン (ニコチン酸) を検出します。ナイアシン検査で陰性となる結核菌株は非常にまれです。マイコバクテリウム種で起こる酸化還元反応は、エネルギー代謝の一部としてナイアシンを生成します。すべての抗酸菌はナイアシンを産生しますが、結核菌ナイアシンを処理することができないため、過剰なナイアシンを蓄積し、過剰なナイアシンを培地に排出し、ナイアシン テストを使用して検出できるようにします。ナイアシン試験は通常、成長の遅い顆粒状の黄褐色のコロニーでのみ実施されます。これは、これらが寒天プレート上の結核菌の形態特性であるためです。パイロシーケンシングやMALDI-TOF MSなどの高価な機器や試薬を必要とする高価な同定方法と比較して、手頃な価格であるためです。
左がナイアシン陰性、右がナイアシン陽性。
コンテンツ
1 生化学的プロセス
1.1 生化学的経路 1.2 テスト ストリップ プロセス
2 試験手順
3 参考文献
生化学的プロセス編集
生化学的経路
結核菌のニコチンアミド アデニン ジヌクレオチド(NAD+) 分解経路は遮断されており、除去経路によって過剰なナイアシンが生成され、生物が処理することができません。この豊富さのために、結核菌はマイコバクテリウム・カネッティおよびさまざまなタイプのマイコバクテリウム・アフリカヌムとともに、過剰なナイアシンを外部環境、この場合は寒天プレートまたは別の培地に放出します。ナイアシンは水溶性であるため、マイコバクテリウム分離株が言及された 3 つの種の 1 つであるかどうかを判断するために、培地をナイアシンの存在について試験することができます。これら 3 種は、結核菌複合体のメンバーです。
テスト ストリップ プロセス
ナイアシン テスト ストリップは通常、チオシアン酸カリウム、クロラミン-T、クエン酸、および4-アミノサリチル酸で構成されています。クエン酸の存在下では、クロラミン-T とチオシアン酸カリウムが反応して塩化シアンを形成します。この化学物質は、ナイアシンのピリジン環を分解してy-カルボキシ グルタコン酸アルデヒドを生成し、芳香族アミンと結合して黄色を形成します。
マイコバクテリウム・スメグマチス（ナイアシン検査陰性）
試験手順
ナイアシン テスト ストリップは、外観がpHテスト ストリップに似ています。小さく、薄く、長方形で、色は白です。培養プレートに水を入れ、小さな無菌チューブ内で 15 ～ 20 分間、テスト ストリップに触れさせます。過剰量のナイアシンが検出された場合、チューブ内の液体は黄色に変わり、陽性反応を示します。チューブ内の液体が透明である場合、ナイアシンの過剰量はなく、検査は陰性です。ナイアシン検査の陽性は必ずしも結核菌の存在を示すわけではありません。これは、他のマイコバクテリウム種が過剰なナイアシンに対して検査で陽性になる可能性があるためです。
検査される検体の各バッチに加えて、結核菌の陽性対照と微生物を含まない陰性対照が含まれます。陽性対照が陰性である場合、おそらくバッチにエラーがあり、陽性を示す陰性検査についても同様です。
抗酸菌であると判断されたラボ サンプルは、バイオ セーフティ レベル 3の生物である結核菌である可能性があるため、すべてのナイアシン テストは、完全なガウン、呼吸用保護具、手袋、および密閉されたラボを備えたバイオ セーフティ キャビネットで安全性を確保するために実施する必要がテストを実行するラボ技術者の。また、すべてのテストは無菌技術で実施する必要が
参考文献
^ a b次の場所にジャンプ: ヤング、WD; マスランスキー、アルヴィン。レファー、レファー。クロニッシュ、ドナルド（1970年12月）。「マイコバクテリアによって産生されるナイアシンを検出するための紙ストリップ試験の開発」 . 応用微生物学。20 (6): 939–945. PMC 377087 . PMID 4321713。
^ a b次の場所にジャンプ:
「標準操作手順 (SOP): ナイアシン テスト」 . stoptb.org 。2016年 11 月 4 日閲覧。
^ c次の場所にジャンプ:
パロミノ、フアン。レオン、シルビア。リタッコ、ヴィヴィアナ編。。結核 2007 (PDF) . 2016 年 6 月 25 日にオリジナルからアーカイブ (PDF)されました。2016年 11 月 2 日閲覧。
^ Acharya、Tankeshwar （2013 年 7 月 22 日)。「マイコバクテリアのグループを識別するために使用される主要な生化学的方法」 . マイクロベオンライン。2016 年 11 月 4 日にオリジナルからアーカイブされました。2016年 11 月 4 日閲覧。
^次の場所にジャンプ:a b c
ガドレ; マハジャン; シン; アガルワル; タルワール (1995)。””マイコバクテリアのナイアシン検査: 2 つの方法の比較研究” (PDF) . 結核のインドジャーナル。42 : 225–226. 2016 年 11 月 4 日にオリジナルからアーカイブ (PDF)されました。2016年 11 月 4 日閲覧。
^次の場所にジャンプ:a b
「ナイアシン試薬ストリップ」 (PDF) . 2005 年 9 月 1 日。2016 年11 月 2 日にオリジナルからアーカイブ (PDF) 。2016年 11 月 2 日閲覧。”