生存率アッセイ

Viability_assay
生存性アッセイは、あるアッセイの能力を決定するために作成された器官、細胞又は組織の生存の状態を維持または回復するために。生存率は、0から1の整数、またはより簡単に理解できる場合は0％から100％の範囲の定量化可能なインデックスを使用することにより、生と死のオールオアナッシング状態と区別できます。生存率は、細胞、組織、および臓器の物理的特性を通じて観察できます。これらのいくつかは機械的活動、運動、などと同様に含ま精子と顆粒球の収縮筋肉を組織または細胞、細胞機能における有糸分裂活性など。生存率アッセイは、生物の活力レベルを測定するためのより正確な基礎を提供します。
このメッキ生存率アッセイは、「フロッグ」と呼ばれる方法でさまざまな酵母の生存率を測定します。研究は、ドロップ接種技術によって完了します。それ以来、「カエル」のバリエーションである「タッドポーリング」の研究が行われています。これは、試験中、テストセルを液体で希釈した状態に保つことで完了します。
生存率アッセイは、生きているものと生きていないものの違いよりも多くの発見につながる可能性がこれらの技術は、細胞培養技術、凍結保存技術、物質の毒性、または毒性物質の影響を軽減する物質の有効性の成功を評価するために使用できます。

コンテンツ
1 一般的な方法
1.1 フロギングとタドポーリング
2 生存率アッセイ法のリスト
3 も参照してください
4 参考文献
5 参考文献

一般的な方法
生存率を観察する簡単な視覚的手法は有用ですが、物理的特性の観察だけを使用して、生物/生物の生存能力の一部を完全に測定することは難しい場合がただし、アッセイを使用して生存率をさらに観察するために利用されるさまざまな一般的なプロトコルが
テトラゾリウム還元：生存率を特定して測定するための1つの有用な方法は、テトラゾリウム還元アッセイを完了することです。処方に正電荷と負電荷の両方を利用するこのアッセイのテトラゾリウムの側面は、検体中の細胞生存率の区別を促進します。
レサズリン還元：レサズリン還元アッセイは、酸化還元の力を使用して細胞の生存率を表す能力を高めることを除いて、テトラゾリウムアッセイのアッセイと非常によく似ています。
プロテアーゼ生存率マーカー：細胞の生存率をターゲットにしたい場合は、検体のプロテアーゼ機能を調べることができます。研究におけるこの実践は、「プロテアーゼ生存率マーカーアッセイの概念」として知られています。プロテアーゼの作用は細胞が死ぬと止まるので、この技術を使用する場合、細胞の生存率を決定する際に明確な線が引かれます。
ATP：ATPは、多くの研究者が幅広い知識を持っている一般的なエネルギー分子であるため、生存率アッセイの理解方法に引き継がれます。ATPアッセイの概念は、ATPの評価と「ホタルルシフェラーゼ」として知られる方法を使用して、細胞の生存率を決定するためのよく知られた手法です。
ナトリウム-カリウム比：別の種類のアッセイでは、細胞内のカリウムとナトリウムの比を調べて、生存率の指標として使用します。細胞が高い細胞内カリウムと低い細胞内ナトリウムを持っていない場合、（1）細胞膜が無傷である可能性があり、および/または（2）ナトリウム-カリウムポンプがうまく機能していない可能性が  
細胞溶解または膜漏出：このカテゴリーには、乳酸デヒドロゲナーゼアッセイが含まれます。このようなアッセイには、すべての細胞に共通する安定した酵素が含まれており、細胞膜が無傷でなくなったときに簡単に検出できます。このタイプのアッセイの例には、ヨウ化プロピジウム、トリパンブルー、および7-アミノアクチノマイシンDが含まれます。
ミトコンドリア活性またはカスパーゼ：レサズリンとホルマザン（MTT / XTT）は、細胞死を予見するアポトーシスプロセスのさまざまな段階をアッセイできます。
機能的：細胞機能のアッセイは、アッセイされる細胞のタイプに非常に特異的です。たとえば、運動性は精子細胞機能の広く使用されているアッセイです。配偶子の生存率は、一般的に、アッセイに使用することができる不妊治療。赤血球は、変形能、浸透圧脆弱性、溶血、ATPレベル、およびヘモグロビン含有量の観点から分析されています。のために移植器官全体、最終的なアッセイは、移植後の生命を維持する能力は、非機能的臓器の移植の予防に有用ではないアッセイです。
ゲノムおよびプロテオミクス：DNAマイクロアレイおよびタンパク質チップを使用して、ストレス経路の活性化について細胞をアッセイすることができます。
フローサイトメトリー：自動化により、毎秒数千の細胞の分析が可能になります。
多くの種類の生存率アッセイと同様に、生理学的機能の定量的測定は、損傷の修復と回復が可能かどうかを示しません。細胞株が付着および分裂する能力のアッセイは、膜の完全性よりも初期の損傷を示している可能性が

フロギングとタドポーリング
「フロギング」は、寒天プレートを環境に利用する生存率アッセイ法の一種であり、液体で希釈した後、段階希釈液を固定して段階希釈することで構成されます。その制限のいくつかには、それが総生存率を考慮しておらず、低生存率アッセイに特に敏感ではないことが含まれます。しかし、それはその速いペースで知られています。「カエル」の開発後に行われる方法である「タドポーリング」は、「カエル」法と似ていますが、そのテストセルは液体で希釈され、検査プロセスを通じて液体に保たれます。「タドポーリング」法は、培養の生存率を正確に測定するために使用できます。これは、「カエル」からの主な分離を表しています。

生存率アッセイ法のリスト
カルセインAM
クローン原性アッセイ
エチジウムホモ二量分析
エヴァンズブルー
フルオレセインジアセテート加水分解/ヨウ化プロピジウム染色（FDA / PI染色）
フローサイトメトリー
ホルマザンベースのアッセイ（MTT / XTT）
緑色蛍光タンパク質
乳酸デヒドロゲナーゼ（LDH）
メチルバイオレット
ニュートラルレッド取り込み（生体染色）
ヨウ化プロピジウム、壊死細胞、アポトーシス細胞、正常細胞を区別できるDNA染色。
レサズリン
TUNELアッセイ

も参照してください
細胞毒性
生体染色

参考文献
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参考文献
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