YES_and_YAS_assay
酵母エストロゲンスクリーニング（YES）および酵母アンドロゲンスクリーニング（YAS）は、天然および合成化合物、混合物、環境サンプルのエストロゲンおよびアンドロゲン活性をそれぞれ検出するために開発されたinvitroスクリーニングです。
このテストは、レポーター遺伝子（例：lacZ）に結合したヒトエストロゲンまたはアンドロゲン受容体の遺伝子を含む遺伝子改変酵母細胞（Saccharomyces cerevisiae）に基づいています。受容体の活性化は、レポーター遺伝子産物（例：β-ガルクトシダーゼ）の発現につながる一連のイベントを開始し、基質（例：CPRG）を変換して、培地中で黄色から赤色への測定可能な色の変化をもたらします。 代替システムは、発光信号の生成に基づいています。活性化（アゴニスティック）サンプルは直接測定できます。阻害（拮抗）活性は、既知の活性化物質の存在下での発色の減少として測定されます。
コンテンツ
1 アッセイフォーマット
2 関連性
3 利点
4 ガイドラインと文献
5 も参照してください
6 参考文献
アッセイフォーマット
YES / YASアッセイは、96ウェルマイクロタイタープレートで行います。総アッセイ時間は通常2〜3日ですが、誘導細胞溶解を使用したより高速なプロトコル（18時間の曝露時間）が開発されています。 YESおよびYASアッセイ用に、独自仕様および公的に入手可能ないくつかの酵母細胞株が開発されています。必要なすべての成分と詳細な手順が記載された市販のキットも利用できます。
関連性
生物のエストロゲンおよび/またはアンドロゲン受容体に対して活性化または阻害効果を持つ物質は、生殖を妨害し、代謝および免疫系に影響を及ぼし、腫瘍の形成を誘発する可能性がこのアッセイは、経口避妊薬の成分（17α-エチニルエストラジオール）、合成物質（ビスフェノールA、フタル酸エステル）、農薬（メトキシクロリン）、非-イオン性界面活性剤（アルキルフェノール）。試験は、文献データとの良好な再現性と一致有し、インビボでまたはインビトロでのデータを
利点
このアッセイは非常に優れた感度を持ち（YESアッセイでの17β-エストラジオールの検出限界は約5 x 10 -12Mまたは1.4ng / L）、 、マイクロプレートフォーマットには少量しか必要ありません。サンプル。天然の水性サンプル、濃縮された環境サンプル、およびエタノールやDMSOなどの溶媒中の化学物質または混合物の分析が可能です。結果は、一晩の曝露後と同じくらい迅速に得ることができます。酵母細胞の取り扱いは、一般的に哺乳類の細胞培養よりも要求が少ないです。
ガイドラインと文献
現在のところ、国際規格はありません。YESアッセイのISOガイドラインは準備中です。
も参照してください
唾液ホルモン検査
参考文献
^ Routledge、EJ and Sumpter、JP（1996）。環境。トキシコール。化学。15（3）：241-248。
^ Sohoni、P。and Sumpter、JP（1998）。エンドクリノール。158、327-339 ^ Purvis、IJ、Chotai、D.、Dykes、CW、Lubahn、DB、French、FS、Wilson、EM、およびHobden、AN（1991）。遺伝子106，35–42。
^ Schultis T. and Metzger JW、2004。Chemosphere 57、1649-1655 ^ Xenometrix AG、Allschwil、スイス。
^ NIH Publication No：03-4503：試験方法評価レポート：In Vitro内分泌かく乱物質スクリーニングアッセイのレビュー（2003）： https：//ntp.niehs.nih.gov/iccvam/docs/endo_docs/edfinalrpt0503/edfinrpt.pdf ^ Kolle、SN、Kamp HG、Huener HA、Knickel J.、Verlohner A.、Woitkowiak C.、Landsiedel R.、van Ravenzwaay B.（2010）トキシコール。In vitro 24（7）：2030-2040